《表2 实时定量PCR引物》

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《Notch信号通路在胰腺癌中的表达及其作用研究》

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经检测合格样本的总RNA参照Villegas-Ruiz等[6]方法由上海吉凯基因代为行基因表达谱芯片分析，反应程序见表1；获得基因表达谱芯片分析数据后通过对比KEGG和BioCarta数据库，采用Fisher精确检验分析并计算Notch信号通路中包含的差异表达基因的富集度水平，筛选出该信号通路中表达存在统计学差异的基因；依据Primer Bank数据库提供的PCR引物信息合成表达存在统计学差异的Notch信号通路成员引物（表2），以GAPDH为内参照，采用实时定量PCR法检测胰腺癌组织及其相应癌旁组织中表达具有统计学差异的基因表达量（目的基因表达量/内参基因表达量），以癌旁组织目的基因表达量做为参照，计算各样本目的基因相对表达量；提取组织样本总蛋白采用Western blot法检测各组样本成员蛋白表达情况，利用Image J软件分析并计算各组样本目的蛋白相较于癌旁组织的相对表达量。