《表2 实时荧光定量PCR引物》

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《水稻矮杆突变体的细胞学特征及基因定位研究》


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以野生型和突变体分蘖期未伸长的新叶为材料,利用Trizol试剂提取总RNA。根据RNA浓度计算反转录所需的RNA体积。c DNA第一链的合成采用Thermo Fisher Scientific公司的反转录试剂,全程配戴口罩和乳胶手套。利用Primer 5软件根据目的基因CDS序列设计引物(表2),实时荧光定量PCR总反应体积为30μL,试剂为SYBR GreenⅠ(Promega),PCR反应在Quant Studio 5 (Life Technologies公司,美国)中完成,实验重复3次[25]。