《表2 实时荧光定量PCR引物序列》

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《牦牛FSHR基因克隆及其在生殖轴中的表达研究》


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根据测序所得牦牛FSHR基因序列和内参基因GAPDH设计定量引物(表2),引物由成都擎科梓熙生物技术有限公司合成。使用SYBR Green荧光染料法进行实时荧光定量PCR检测,每个样品作3次重复。实时荧光定量PCR反应体系15μL:cDNA 1μL,PowerUpTMSYBRTMGreen MasterMix7.5μL,上、下游引物各0.5μL,ddH2O 5.5μL。实时荧光定量PCR反应程序:95℃预变性3 min;95℃变性10s,59.4℃退火30s,共39个循环。