《表2 实时荧光定量PCR引物序列》

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《蛋氨酸限制对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛功能损伤的改善作用》

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参照试剂盒说明书，以β-actin为内标，测定B细胞淋巴瘤基因2(B-cell lymphoma 2，Bcl-2）、Bcl-2同源促凋亡基因（Bcl-2 associated protein X，Bax）、转录因子X盒结合蛋白-1(X-box binding protein-1，Xbp-1）、胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase，CSE）、胱硫醚-β-合成酶（cystathionine-β-synthase，CBS）、葡萄糖转运载体2(glucose transporter 2，GLUT2）、肌腱膜纤维肉瘤肿瘤基因同系物A(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma?oncogene?homologue?A，Maf A）、十二指肠同源框因子-1(pancreatic duodenal homeobox-1，Pdx-1）、CHOP、IRE1-α和Bip mRNA的表达量，引物序列如表2所示。使用实时荧光定量PCR仪检测各模板的Ct值，通过2-ΔΔCt法进行相对定量。反应体系如下：0.4?μL上游引物（10?μmol/L）、0.4?μL下游引物（10?μmol/L）、5.4?μL?SYBR Green Master Mix、3.7?μL无菌水和0.5?μL?cDNA模板，形成10?μL体系。扩增条件如下：95℃预变性5 min；95℃变性20 s，62℃退火30 s，72℃延伸60 s，循环40次；72℃终末延伸2 min；4℃冷却。