《表2 实时荧光定量PCR引物序列》

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《哺乳期补饲精氨酸对断奶仔猪肝脏脂代谢功能的影响》


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从-80℃取出肝脏样品,使用Trizol提取样品的总RNA,测定纯度(Applied BiosystemsTM7500),RNA质量通过琼脂糖凝胶电泳鉴定。将合格的RNA反转录为cDNA,存放于-80℃中待测,具体方案根据TaKaRa试剂盒说明书(TaKaRa RR047A)进行。通过NCBI PubMed获得所需的引物,引物序列如表2所示。特异性引物由金维智生物科技有限公司(GENEWIZ,苏州)合成。以磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为内参,对目的基因进行相对定量分析。使用2-ΔΔCt方法计算目的基因的相对表达水平。反转录和荧光定量试剂盒购自TaKaRa生物技术有限公司,并且严格按照说明书中规定的程序进行操作。