《表2 实时荧光定量PCR引物序列》
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《紫花苜蓿(Medicago sativa)YABBY基因家族的生物信息学分析及其对逆境胁迫的响应》
采用Premier 5.0进行设计引物(表2),紫花苜蓿GAPDH作为内参,YAABY2为目的基因,Quantageneq225实时荧光定量PCR仪完成整个试验,实验反应体系(10μL)为:5μL 2×ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix(Vazyme),cDNA 0.5μL,终浓度为10μmol/L的上下游引物各0.2μL,ddH2O 4.1μL。加入上述反应成分,离心混匀后置于实时荧光定量PCR仪进行扩增,扩增程序为:95℃变性10 s,59℃退火30 s,72℃延伸30 s,共循环40次。反应结束后,通过检测溶解曲线来确定PCR产物的特异性,2-ΔΔct计算基因在不同处理时间下的相对表达量,利用IBMSPSS19.0软件分析其结果之间的差异显著性。
图表编号 | XD00131428500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.28 |
作者 | 尹航、袁玉莹、宋婷婷、张攀、孙雪、项继红、李佳玮、崔国文 |
绘制单位 | 东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院、东北农业大学动物科学学院 |
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