《表2 实时荧光定量PCR引物序列》

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《柑橘紫色酸性磷酸酶PAP基因的低磷胁迫表达特征》

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以柑橘β-Tubulin为内参，利用Primer 3.0在线软件设计的Cs PAPs特异性表达引物（表2），通过实时荧光定量PCR仪（Roche Light Cycler 96，瑞士）进行q RT-PCR，所用试剂盒为SYBR GreenⅠ（Vazyme，南京）；反应体系总体积为20μL，其中10μL反应Mix，0.8μL上、下游引物（表2），2μL c DNA，7.2μL dd H2O。反应程序为95℃预变性10 min；95℃变性10 s、60℃退火30 s （45个循环）；95℃10 s、60℃60 s、95℃15 s；最后97℃60 s。用Sigmaplot 12.5软件对实验数据进行统计分析。