《表2 实时荧光定量PCR引物序列》

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根据GenBank提供的猪基因序列,用Primer Express 5.0软件设计TLR-4、TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10的基因特异性扩增引物。引物序列见表2,引物由上海生物工程有限公司合成。提取空肠黏膜总RNA,以磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为内参,按照PrimeScript RT Reagent Kit with gDNA E-raser反转录试剂盒说明进行反转录。以反转录产物为模板使用定量PCR仪(伯乐CFX96,美国)进行基因扩增,测定空肠黏膜TLR-4、TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10 mRNA相对表达量。