《表2 实时荧光定量PCR引物信息》

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《冷却治疗对劳力性热射病大鼠下丘脑AVPmRNA表达及蛋白表达的影响》


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采用荧光定量q RT-PCR检测系统测试下丘脑AVPmRNA表达。取适量组织放入液氮预冷的研钵中研磨成粉末并转移到EP管中,用Trizol(美国Invitrogen公司)试剂抽提总RNA,用反转录试剂盒(Takara)将RNA反转录为cDNA,加入根据GenBank数据库中查找的相关基因序列设计的特异性引物(见表2),采用EvaGreen饱和染料Mix进行实时荧光定量q RT-PCR检测(见图1)[14]。根据各反应孔的△CT值,运用2-△△CT相对定量法计算目的基因的相对表达量。用内参GAPDH对其进行标准化。