《表2 实时定量PCR引物序列》
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《低钙、磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1~42日龄黄羽肉鸡生长性能、胫骨指标和钙磷代谢的影响》
在80 mg肾脏样品中加入1 mL Trizol试剂(TaKaRa,日本)提取总RNA。依照试剂盒(TaKaRa,日本)说明书将提取的RNA(1μg)反转录为cDNA。根据GenBank中鸡的基因序列,使用Primer Premier 3.0设计引物(表2)。荧光定量PCR反应体系(20μL):2μL cDNA,10μL SYBR Green 2×Mix,上、下游引物各1μL(100 nmol/L),6μL ddH2O。反应条件:95℃预变性3 min;95℃变性15 s,退火30 s,72℃延伸30 s,40个循环。以β-肌动蛋白(β-actin)作为实时荧光定量PCR的内参基因。采用2-ΔΔCt法计算目的基因表达量。
图表编号 | XD0030426600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.01 |
作者 | 范秋丽、蒋守群、苟钟勇、李龙、林厦菁、王一冰 |
绘制单位 | 广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业部华南动物营养与饲料重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室、广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业部华南动物营养与饲料重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室、广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农业部华南动物营养与饲料重点实验室广东省动物育种与营养公共实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室、广东省农业科学院动物科学研究所畜禽育种国家重点实验室农 |
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