《表2 实时定量PCR引物序列》

《表2 实时定量PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《低钙、磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1~42日龄黄羽肉鸡生长性能、胫骨指标和钙磷代谢的影响》


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在80 mg肾脏样品中加入1 mL Trizol试剂(TaKaRa,日本)提取总RNA。依照试剂盒(TaKaRa,日本)说明书将提取的RNA(1μg)反转录为cDNA。根据GenBank中鸡的基因序列,使用Primer Premier 3.0设计引物(表2)。荧光定量PCR反应体系(20μL):2μL cDNA,10μL SYBR Green 2×Mix,上、下游引物各1μL(100 nmol/L),6μL ddH2O。反应条件:95℃预变性3 min;95℃变性15 s,退火30 s,72℃延伸30 s,40个循环。以β-肌动蛋白(β-actin)作为实时荧光定量PCR的内参基因。采用2-ΔΔCt法计算目的基因表达量。