《表2 实时定量PCR引物序列》

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《饲粮添加亚麻籽和维生素E对北京油鸡肌肉n-3多不饱和脂肪酸富集和抗氧化特性的影响》

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屠宰时，取适量肝脏和胸肌肉于分子管中，放于液氮中，后取出放入-80℃冰箱中，待测基因表达。利用Trizol提取肝脏总RNA，使用Nano Drop 2000(Thermo，美国）紫外分光光度计测定RNA的浓度和纯度，并在1%变性琼脂糖上凝胶电泳，检测其完整性，使用PrimeScript RT(TaKaRa，日本）试剂盒反转录合成cDNA，根据NCBI公布的基因序列设计合成引物（表2）。使用CFX96TM实时系统（Bio-Rad，美国）以20μL反应体积进行实时定量PCR。反应温度：95℃30 s，95℃10 s、60℃30 s、72℃40 s，35个循环。内参基因为β-肌动蛋白。采用2-ΔΔCt法计算基因相对表达量，3次重复结果计算平均值和标准差。