《表3 葡萄糖淀粉酶Tl GA、HjGA、AmyT1的结构比较》

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《篮状菌Talaromyces leycettanus JCM12802来源的高温葡萄糖淀粉酶性质与结构》

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分析葡萄糖淀粉酶一级结构时，主要从特殊氨基酸组成、N-糖基化位点和形成二硫键数目这3个特点进行比较分析。Arg和Pro在3种不同葡萄糖淀粉酶序列中出现的频率差异不大，但是Gly在Tl GA中所占的比例明显低于HjGA和AmyT1（表3）。Gly作为柔性最强的氨基酸，它在蛋白分子中出现的频率与整个蛋白分子的柔性密切相关，这在以往的研究中已被广泛证实[30]。根据报道，蛋白的糖基化程度和二硫键数目也与其稳定性密切相关[31，32]；我们对其进行了比较分析，发现在不同葡萄糖淀粉酶分子的N-糖基化位点与其温度特点没有明显规律；但是在二硫键组成方面，低温葡萄糖淀粉酶AmyT1和中温葡萄糖淀粉酶HjGA均有4对二硫键，而高温葡萄糖淀粉酶Tl GA仅有3对。众所周知，二硫键是维持蛋白酶稳定的重要作用力；在蛋白的热稳定性改良时，引入二硫键也是一个重要的策略。但是在高温葡萄糖淀粉酶Tl GA材料中二硫键缺失的生物学意义尚不清楚。因此，从氨基酸组成上来看，低频率的Gly是葡萄糖淀粉酶Tl GA高温耐受性的重要原因之一。