《表2 引物序列:外源GA_3对葡萄花序伸长及赤霉素合成代谢相关基因表达的影响》

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《外源GA_3对葡萄花序伸长及赤霉素合成代谢相关基因表达的影响》


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以上述所得RNA为模板,使用GoTaq qPCR Master Mix(Promega公司)进行PCR扩增。qRT-PCR反应体系为20μL:cDNA模板4μL,上下游引物各0.4μL,Mix 10μL,ddH2O 5.2μL。程序为:95℃预变性2 min;95℃变性5 s,60℃延伸30 s,循环40次,60℃~90℃溶解曲线分析。引物使用在线设计软件设计(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/),由上海生工公司合成(表2)。以Actin的表达水平为内参,基因的相对表达量按BIO-RAD CFX荧光定量仪使用说明进行分析,数据使用Excel和Origin Pro8.5软件进行分析。