《附表1 本文中所用引物序列信息》

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《玉米HD-ZIP I亚家族基因鉴定及表达分析》


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将胁迫和激素处理后的玉米幼苗分别在液氮中研磨至粉末状,参照试剂盒说明书,加入适量的Tripure Isolation Reagent(Promega,USA)进行总RNA的提取。用RNase-free DNase预处理所有样品提取的总RNA,分别选取1μg用M-MLV RTase cDNA Synthesis Kit(TaKaRa,Japan)进行反转录。在BioRad CFX96 Real-time System进行Real-time PCR扩增。使用iTaq Universal SYBR Green Supermix(BioRad,USA)试剂盒并按其提供的方法,扩增体系为25μL。反应程序为94℃3 min,94℃10 s,58℃30 s,共40个循环。每个样品以肌动蛋白(ZmActin1,GRMZM2G126010)为内参,重复3次,结果用进行相对定量分析[39]。选用PRIMER 5设计所有引物,且横跨一个内含子(附表1)。