《表1 本文使用的引物及探针序列》
注:*由于序列申请专利中,信息不便提前公开,申请号CN201710259976.4Note:*Because the sequence is patent application,the information is inconvenient to announce in advance,application number was CN201710259976.4
目前国内尚无批准产品用于非洲猪瘟病毒的检测,OIE和中国动物疫病预防控制中心均推荐应用PCR和实时荧光PCR作为实验室确诊方法,目的核酸则多为较保守的P72蛋白基因。从本实验室应用结果看,两种方法都可较快速实现病原学确诊,特异性和敏感性满足当前疫情监测需要,但不同引物对或其与探针(序列信息见表1)的组合各有优缺点。以OIE推荐引物为例,其目的片段为278bp,PCR耗时较短,但在扩增部分样品和52℃以下退火温度时,容易出现非特异扩增条带,且较小的非特异带和模板中残留的RNA易干扰电泳和观察,影响结果判定(图4),建议使用目的片段不小于400bp的PCR引物(图5)。表1使用的定量PCR均有良好表现(图6)。
图表编号 | XD00188479800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.11.01 |
作者 | 王颖、缪发明、陈腾、周鑫韬、李楠、吕宗吉、张静远、刘晔、张国军、张守峰、扈荣良 |
绘制单位 | 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、佛山科学技术学院生命科学与工程学院、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、吉林和元生物工程股份有限公司、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所 |
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