《表1 甲基化检测模板、引物及探针的序列》

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《基于核酸侵入反应偶联PCR的粪便样本基因甲基化定量分析方法及用于结直肠癌无创筛查》

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注:下划线部分表示Flap片段序列，与模板不互补；斜体部分为修饰的荧光基团和淬灭基团；荧光发卡探针的双下划线部分为自身形成发卡的序列。Note:Underlined sequences of detection probes are flaps and not complementary to the templates.Italicized parts are modified fluo

Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪（德国QIAGEN公司）；One Drop OD-1000 spectrophotometer（南京五义科技有限公司）；Allegra X-30R冷冻离心机（美国Beckman Coulter公司）；FEN1核酸内切酶（FEN1酶，实验室自表达[22]）；Go TaqHot Start DNA聚合酶（美国Promega公司）；QIAampFast DNA Stool Mini Kit（德国QIAGEN公司）；EZ DNA Methylation-GoldTMKit（美国ZYMO RESEARCH公司）；HCT116细胞基因组DNA（方法学建立时的甲基化模板）；健康人基因组DNA（方法学建立时的非甲基化模板）；其它试剂均为分析纯。寡核苷酸片段由上海Invitrogen公司合成，具体名称及序列见表1，引物和探针共覆盖8个BMP3基因甲基化检测常用的Cp G位点[8~10]。