《表1 ARMS-双Taq Man方法检测肥胖相关基因位点突变引物及探针序列》

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《肥胖相关基因FTO-rs17817449和SEC16B-rs574367多态性与代谢综合征相关性研究》

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注:引物序列中下划线碱基是引入的错配碱基，用以增加引物特异性

FTO-rs17817449和SEC16B-rs574367检测采用等位基因特异性引物（ARMS原理），以Taq ManMGB探针作为检测信号代替传统的琼脂糖凝胶电泳，通过测定不同等位基因特异引物分别与公用引物和Taq Man探针建立的2个反应体系的Ct值，根据ΔCt（ΔCt=野生引物反应体系Ct值-A突变引物反应体系Ct值）判定基因型，建立实时荧光定量PCR分型检测方法（ARMS-Taq Man方法）。本研究实际检测中建立了多重PCR反应体系，即FTO-rs17817449的T反应体系和SEC16B-rs574367的C反应体系合并为1管中反应；FTO-rs17817449的G反应体系和SEC16B-rs574367的A反应体系合并为另1管反应体系，每管反应体系同时检测VIC和FAM荧光信号，再根据两管间的VIC或FAM荧光信号的ΔCt值判定等位基因型。引物和探针序列见表1。