《表3 Taq Man探针实时荧光PCR方法结果判定依据》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《两种生化制药用原材料粗品中动物源成分的PCR检测》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

Taq Man探针实时荧光PCR法:取稀释至10 ng·μl-1的样品分别用猪、牛、羊源检测试剂盒进行Taq Man探针实时荧光PCR反应。反应体系:2×反应预混液12.5μl，引物混合液1μl，探针混合液1μl，模板DNA 1μl，加水至25μl。每组试验设阳性对照和阴性对照，阳性对照以试剂盒自带的阳性质控品溶液作为模板DNA，阴性对照以试剂盒自带的d H2O代替模板DNA，其他成分按上述体系添加。反应条件:95℃，10 s，1个循环；95℃5 s，60℃30 s，收集荧光信号，共进行40个循环。以第3～15个循环荧光值标准偏差的10倍为阈值，根据达到阈值荧光强度所需的循环数（即Ct值）及试剂盒说明书的要求对试验结果进行判定。阳性对照要求羟基荧光素（FAM）和六氯荧光素（HEX）有荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，Ct值应小于28.0；阴性对照要求HEX荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，Ct值应小于28.0，而无FAM荧光信号检出。样品的具体判定依据见表3。