《表1 Taq Man探针荧光定量PCR反应体系》

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《中国儿童急性淋巴细胞白血病GATA3基因单核苷酸多态性与预后的相关性研究》


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收集入组儿童缓解期骨髓样本,分离单个核细胞,采用DNA提取试剂盒(QIAGEN)抽提基因组DNA。Taq MGB probes,FAMTMand dye labeled探针购自ABI公司(Catalog Number 4351379),按照下列表1配置5μl体系,在ABI PRISM 7900HT仪器内设置反应条件:95℃预变性10 min,92℃变性15 s,60℃退火/延伸1 min,共40个循环。利用Sanger测序验证Taq Man探针法检测结果:2个SNPs位点的3种不同基因型,每种基因型各取10份基因组DNA(引物序列rs3781093:5'-TTCCTGTGCTCT-GTTCCTT;rs3824662:5'-TATCACCCTCCCCACCA)送上海生工生物工程技术服务有限公司进行Sanger单向测序。