《表1 双重TaqMan探针实时荧光定量PCR反应体系》

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《绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种双重TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立及应用》

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通过对Mo和Mmc引物及探针终浓度的优化，最终确定25μL最佳的反应体系如表1。扩增条件为:95℃预变性3 min；95℃变性10 s，55℃退火30s，72℃延伸20 s，40个循环；反应在BIO-RAD CFX96实时荧光定量PCR仪上进行。