《表1 HLA-DP基因rs9277535位点的FQ-PCR引物及探针序列》

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《难治性慢性丙型肝炎中医证型与HLA-DP基因SNP的相关性研究》

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按湖北省中医院用户手册标准采集所有研究对象外周静脉EDTA抗凝血液5mL；依照基因组DNA提取试剂盒（北京天根公司生产）操作说明书的步骤提取人类基因组DNA；再采用超微量核酸分析仪（Eppendorf公司，德国）测定DNA浓度；根据HCV基因组5′-UTR、C/E1和NS5B的序列及HLA-DP基因rs9277535位点G/A，采用Vector NTI11.0软件设计引物和探针序列，送上海生工生物工程有限公司合成引物和探针序列，见表1。采用优化后的双重FQ-PCR技术同步检测标本中HLA-DP基因rs9277535位点G或A。优化后的双重荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）反应体系:2xTaqMan Fast qPCR Master Mix 5.00μL，10μmol/L正向引物0.25μL，10μmol/L反向引物0.25μL，10μmol/L A-、G-探针各0.20μL，DNA模板0.20μL，ddH2O 2.10μL。