《表2 甲基化特异性PCR引物序列》

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《DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响》

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收集各组LNCap细胞，按照DNA提取试剂盒提取细胞DNA。根据DNA甲基化试剂盒操作将DNA中所有非甲基化胞嘧啶转换成尿嘧啶，设计合成各基因甲基化（M）与非甲基化（U）引物。见表2。MSP反应条件为95℃10 min，95℃30 s，56℃30s，72℃30 s，共40个循环，72℃终延伸10 min。反应结束后取产物进行琼脂糖凝胶电泳。同时采用Methy Light定量PCR法定量分析各基因甲基化水平，并以甲基化百分比参数表示，其具体方法及计算过程参考相关文献[6]。