《表1 甲基化特异性PCR引物》

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《乳腺癌中PRDM2、PRDM5、PRDM16的甲基化检测及临床意义》

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PRDM2、PRDM5、PRDM16引物序列见表1。MSP反应体系为20μl，2×Premix Taq 10μl，10倍稀释MSP模板1μl，上下游引物各0.5μl，H2O 8μl，每个样品设置3个重复。在PCR仪器上进行反应，程序设定为95℃预变性5 min；95℃40 s、58℃40 s、72℃1 min，35个循环；72℃延伸10 min，结束后将反应物稀释50倍作为第二轮MSP的模板，反应体系与程序设置与第一轮相同，取第二轮MSP反应物5μl经琼脂糖凝胶电泳后，置于凝胶成像仪中观察结果。