《表2 实时荧光定量PCR和甲基化PCR引物》

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《叶酸添加水平对肉仔鸡肝脏中脂肪代谢相关基因表达和甲基化的影响》

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根据LPL（注册号:NM＿205282）、PPARγ（注册号:XM＿414308）和FAS（注册号:NM＿205155）基因的编码区，以β-肌动蛋白（β-actin）（注册号:L08165） 为内参基因，利用Primer Primer 5.0设计特异性引物，引物序列见表2。以上述cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR（RT-qPCR）分析。按照宝日医生物技术（北京）有限公司定量PCR试剂盒建议的反应体系，混合反应物，总体积为25μL。利用Roche Light Cycler 480仪器进行扩增，程序为94℃预变性30 s；94℃变性10 s，退火10 s，72℃1 s，循环40次。每个样本设3个重复，并设阴性对照。采用2-△△ct法计算目的基因的相对表达量。