《表1 实时荧光定量PCR引物和PPO、GFP的dsRNA引物序列》

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《白背飞虱酚氧化酶原PPO基因特性及其免疫应答》


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用Premier 5软件设计3个SfPPO合适的dsRNA特异性引物片段,特异性引物由上海Invitrogen公司合成。然后使用合成的特异性引物进行PCR扩增,产物进行T克隆,具体引物序列见表1。再使用带T7启动子的引物进行交叉PCR反应,对照T7RiboMAXTM Express RNAi System试剂盒的操作说明合成3个SfPPO的dsRNA。通过NanoDropTM 2000测定合成的ds RNA的浓度及纯度,同时对照组GFP的dsRNA也采用同样的方法合成[15]。