《表2 ds Md Cht2组与ds GFP组转录组差异表达基因的实时荧光定量PCR验证引物序列》

《表2 ds Md Cht2组与ds GFP组转录组差异表达基因的实时荧光定量PCR验证引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《基于RNA干扰的家蝇几丁质酶2的幼虫转录组测序》


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从转录组测序所鉴定的差异基因中随机选取8个差异基因(表2),利用q RT-PCR验证差异基因.用Trizol法提取干扰后24 h家蝇幼虫的总RNA,用逆转录试剂盒将提取的总RNA逆转录成c DNA,以逆转录的c DNA为模板,并以GAPDH为内参进行q RT-PCR.20μL反应体系如下:SYBR?Green Realtime PCR Master Mix 10μL,上游引物0.8μL,下游引物0.8μL,ROX Reference Dye(50×)0.4μL,c DNA 2.0μL,dd H2O 6.0μL.反应程序:95℃预变性30 s;95℃变性5 s,60℃退火34 s,共40个循环.反应在ABI 7500 fast定量PCR仪上进行,采用2-ΔΔCT方法计算并分析试验数据.