《表1 转录因子基因和内参基因的实时荧光定量PCR引物》

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《基于转录组分析筛选牛心朴子响应低温胁迫的转录因子家族》

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选取4个差异表达转录因子基因进行实时荧光定量PCR检测，以EF-1-α为内参基因，按照SYBR?Premix Ex TaqTM(Tli RNaseH Plus）试剂盒说明配制反应体系，扩增反应在ABI 7500 Thermocycler上进行（Wang et al.，2011）。扩增程序：95℃预变性30 s；95℃5 s，60℃34s，进行40个循环；95℃15 s，60℃1 min，95℃15 s。采用2-ΔΔCt法换算目的基因的相对表达量。4个差异表达转录因子基因的实时荧光定量PCR扩增因引物如表1所示。