《表1 实时荧光定量PCR基因及其引物》

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随机挑选12个差异表达基因验证其4个处理表达情况,各基因扩增引物见表1,Actin4为内参基因。优化后PCR反应程序为:95℃预变性30 s、95℃变性5 s、58℃退火30 s、72℃延伸20 s,40循环;PCR反应后缓慢升至95℃,绘制溶解曲线。引物均由生工生物工程(上海)有限公司合成,每个基因设3次重复。