《表2 荧光实时定量PCR检测的基因及其引物》

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《维氏气单胞菌的smpB、tmRNA及hfq敲除菌株减毒活疫苗筛选》

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选取维氏气单胞菌中18个毒力相关基因，设计相应的实时定量PCR引物（表2）。提取维菌野生型及各敲除型的总RNA，采用Ta KaR公司生产的反试剂盒进行反转录，得到模板cDNA，利用Ta KaRa公司生产的TB Green染料，通过嵌合荧光法进行检测。使用仪器为罗氏（Roche）公司的LightCycler?96qPCR仪。使用“相对表达量=2-ΔΔCq”公式计算得到各基因的表达变化，并且使用GraphPad prism7.0进行作图以及t校验。