《表2 实时荧光定量PCR使用的基因引物序列》

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《稳定敲降NF-YB基因HeLa细胞系的构建》

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收集细胞，加入500μL的Trizol，在冰上静置待其充分裂解，加入1/5体积的三氯甲烷振荡混匀离心，吸上层水相至RNase free的EP管中加入等量的异丙醇混匀离心，弃上清收集RNA沉淀，用70%的乙醇清洗后加入适量DEPC水溶解，最后用酶标仪紫外分光光度法定量RNA。取等量RNA用Mon ScriptTMRTⅢAll-inOne Mix with ds DNase试剂盒将RNA逆转录为c DNA。实时荧光定量PCR使用2×Real Star Green Power Mixture with ROXⅡ试剂盒。实时荧光定量PCR使用的基因引物序列见表2。