《表1 实时荧光定量PCR的CYP1A1和β-actin基因引物序列》

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《饮水型砷暴露地区人群血液CYP1A1mRNA表达对砷中毒患病情况的影响》


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注:CYP为细胞色素P450

目的基因CYP1A1和内参基因β-actin cDNA实时荧光定量PCR反应体系均为20μL,其中包括2×QuantiFast SYBR Green PCR Master Mix 10μL、cDNA1.5μL、上游引物(10μmol/L)0.5μL、下游引物(10μmol/L)0.5μL和无酶水7.5μL。阴性对照分别以1.5μL无酶水和1.5μL RNA样品代替c DNA模板,阳性对照用测序确定的克隆质粒代替cDNA模板,每个样本测两个重复样。反应条件均为95℃5min,95℃10 s,59℃30 s,40个循环。根据美国国立生物技术信息中心(NCBI)发布的CYP1A1及人类β-actin基因mRNA序列设计引物(见表1),由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。