《表1 荧光实时定量PCR引物和TPS3及GFP的dsRNA引物序列》

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《褐飞虱一个新的海藻糖合成酶基因的特性、发育表达及RNAi效果分析》

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从4龄褐飞虱开始，每12 h取材一次，每次随机取3组，每组7头，抽提总RNA，反转录成c DNA，用于通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测褐飞虱TPS1、TPS2及TPS3在不同发育时期的相对表达量。选用褐飞虱18S作为内参基因[36]，使用Primer Premier 5.0软件设计褐飞虱TPS1、TPS2及TPS3的qRT-PCR引物（表1）。对引物进行梯度PCR验证，根据Tm值选择最适退火温度，并分析熔解曲线，进行琼脂糖凝胶电泳，确保PCR产物的特异性。