《表1 实时荧光定量PCR引物及探针序列》

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《应用实时荧光定量PCR法检测仔猪肠道内乳酸杆菌和双歧杆菌》

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在NCBI中查找乳酸杆菌和双歧杆菌16S r RNA序列，使用软件DNA MAN对比找出序列的同源性，进而发现乳酸杆菌和双歧杆菌的16S rRNA基因保守区。依据其16S r RNA特异性基因序列并参照国外文献，利用引物设计软件Primer Premier 6设计乳酸杆菌和双歧杆菌种属特异性探针及引物，将设计出的引物通过NCBI中BLAST与基因库内其他序列比对，确定引物和探针序列具有特异性。探针及引物均由上海生工生物技术有限公司合成。实时荧光定量PCR引物及探针序列如表1所示。