《表1 实时荧光定量PCR和ds Nl Tret1、ds GFP的引物序列》

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《两个褐飞虱海藻糖转运蛋白基因的结构及调控海藻糖代谢功能》


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T7 sequence:GGATCCTAATACGACTCACTATAGG

用Primer 5软件设计两个Nl Tret1的ds RNA特异性片段并使用合成的特异性引物进行PCR扩增,产物进行T克隆,具体引物序列见表1。随后用带T7启动子的引物进行交叉PCR反应,根据T7 Ribo MAXTM Express RNAi System试剂盒的说明进行ds RNA合成,待ds RNA合成后,采用Nano DropTM 2000测定合成的ds RNA浓度,同时以绿色荧光蛋白基因(GFP)作为对照组,采用同样的方法合成GFP的ds RNA。