《表1 荧光定量PCR验证感染后差异表达基因引物》
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《基于RNA-Seq技术分析非致病细胞病变BVDV感染牛单核细胞对NF-κB信号通路的影响》
为了进一步验证测序结果的准确性,以GAPDH为内参基因,筛选了18个NF-κB信号通路基因,采用实时荧光定量PCR(real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法验证基因表达量。用Primer5.0软件设计基因定量引物,基因名称及引物信息见表1。利用天根总RNA提取试剂盒提取RNA,利用Intivtrogen公司的反转录试剂盒合成cDNA.基因的表达利用罗氏LightCycler 480系统进行检测。PCR扩增程序如下:95℃5min;95℃30s,58℃30s,72℃30s,共45个循环。采用2-ΔΔCt计算得到基因的相对表达量。
图表编号 | XD00116805900 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.20 |
作者 | 何延华、马旭升、钟发刚、黄新、张云峰、赵新霞、陈创夫 |
绘制单位 | 新疆生产建设兵团动物疾病防控重点实验室、省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室、新疆医科大学厚博学院、省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室、省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室、省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室、新疆生产建设兵团动物疾病防控重点实验室、新疆生产建设兵团动物疾病防控重点实验室 |
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