《表1 荧光定量PCR验证感染后差异表达基因引物》

《表1 荧光定量PCR验证感染后差异表达基因引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《基于RNA-Seq技术分析非致病细胞病变BVDV感染牛单核细胞对NF-κB信号通路的影响》


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为了进一步验证测序结果的准确性,以GAPDH为内参基因,筛选了18个NF-κB信号通路基因,采用实时荧光定量PCR(real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法验证基因表达量。用Primer5.0软件设计基因定量引物,基因名称及引物信息见表1。利用天根总RNA提取试剂盒提取RNA,利用Intivtrogen公司的反转录试剂盒合成cDNA.基因的表达利用罗氏LightCycler 480系统进行检测。PCR扩增程序如下:95℃5min;95℃30s,58℃30s,72℃30s,共45个循环。采用2-ΔΔCt计算得到基因的相对表达量。