《表1 PCR引物：非核糖体肽合成酶腺苷化结构域在E.coli中的表达及底物特异性分析》

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《非核糖体肽合成酶腺苷化结构域在E.coli中的表达及底物特异性分析》

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注：表1中下划线：表示酶切位点。

根据NRPS-A基因序列和表达载体特征设计了4条引物（表1）。PS1、PS2、PS3均为上游引物，分别引入NdeⅠ、BamHⅠ和NcoⅠ限制性酶切位点；PA为下游引物，引入限制性酶切位点XhoⅠ。PS1/PA的扩增产物和pET-21b载体构建的重组载体中含His·tag基因，PS3/PA的扩增产物和pET-21b载体构建的重组载体有T7·ag基因，PS1/PA的扩增产物和pET-22b载体构建的重组载体中含有His·tag基因，PS3/PA的扩增产物与pET-22b载体构建的重组载体含有pelB leader基因。T7·tag可以增加融合蛋白的溶解性，His·tag用于融合蛋白的纯化；pelB leader可以帮助融合蛋白的分解到细胞外。