《表1 引物：新型双功能谷胱甘肽合成酶的真核和原核表达》

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《新型双功能谷胱甘肽合成酶的真核和原核表达》

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根据GenBank公布的新型双功能谷胱甘肽合成酶基因序列（EFV98076）以及毕赤酵母和大肠杆菌表达载体上多克隆位点的特征，分别设计引物对F1/R1和F2/R2（见表1）。其中引物F1含有SnaB I酶切位点（下划线部分），引物R1含有Not I酶切位点（下划线部分）；引物F2含有Not I酶切位点（下划线部分），引物R2含有Sal I酶切位点（下划线部分）。以提取的基因组DNA为模板，分别以F1/R1和F2/R2为引物进行PCR反应以扩增目的基因gshF。PCR反应体系（50μL）:TaKaRa PrimeSTAR Max Premix（2×）25μL，正反向引物（10μmol·L-1）各0.5μL，上述模板1μL，H2O 23μL。