《表1.试验所用引物:单核细胞增多性李斯特菌谷胱甘肽合成酶调控鞭毛形成研究》

《表1.试验所用引物:单核细胞增多性李斯特菌谷胱甘肽合成酶调控鞭毛形成研究》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《单核细胞增多性李斯特菌谷胱甘肽合成酶调控鞭毛形成研究》


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于NCBI获得gsh F基因序列后,针对gsh F基因上游片段536 bp处与下游片段500 bp处设计相应的引物Δgsh F-up-F、Δgsh F-up-R、Δgsh F-down-F和Δgsh F-down-R。以EGD-e基因组为模板,利用上述引物扩增得到大小为536 bp、500 bp的片段。以上述片段为模版,引物为Δg s h F-u p-F、Δgsh F-down-R,扩增得到大小为1036 bp的片段。利用Bam H I和Pst I双酶切上述基因片段及温敏型穿梭质粒p KSV7,将酶切后的基因片段及温敏型穿梭质粒p KSV7酶连后,进行热激转化。利用PCR筛选获得含重组质粒(命名为p SL1628)的大肠杆菌。测序验证正确后,获得用于构建gsh F基因缺失株的重组质粒。