《表1 qPCR引物序列:多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶过表达对肺癌细胞A549增殖和凋亡的作用及其机制》

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《多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶过表达对肺癌细胞A549增殖和凋亡的作用及其机制》


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依照RNA提取试剂盒说明书中的方法提取各组细胞总RNA。然后按照逆转录试剂盒说明书方法进行逆转录得到cDNA,再以cDNA为模板,按照qPCR试剂盒说明书方法检测PD-1和PD-L1的mRNA表达水平。反应条件为:95℃10 min,95℃30 s,60℃1 min,扩增35个循环。输出Ct值,采用2-ΔΔCt方法计算相对表达量,按照下列公式计算:ΔCt(test)=Ct target,test-Ct ref,test;ΔCt(calibrator)=Ct target,calibrator-Ct ref,calibrator;ΔΔCt=ΔCT(test)-ΔCT(calibrator)。引物序列见表1。