《表1 甲基化特异性PCR引物信息》

《表1 甲基化特异性PCR引物信息》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《肾素基因启动子区域甲基化水平与精神分裂症患者认知损害的关联》


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采用Massarray飞行时间质谱法分两段检测了肾素启动子区域CpG位点的甲基化水平,检测片段信息见图1~2。实验步骤及原理:(1)采用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶;(2)利用末端带有T7启动子的引物(表1)进行PCR扩增,并用虾碱性磷酸酶处理;(3)利用T7RNA聚合酶将扩增产物转录为RNA;(4)采用尿嘧啶特异性切割,酶切后的片段长度与分子量取决于第一步处理后的碱基变化;(5)利用飞行时间质谱分析每个片段的分子质量,并用EpiTYPER软件分析出每个CpG位点的胞嘧啶甲基化水平。