《表1 AHCY、CBS基因甲基化特异性引物序列》

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《Hcy代谢相关基因甲基化与脑梗死的相关关系》

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注:F表示甲基化特异性上游引物，R表示甲基化特异性下游引物，（1） 表示58℃时ACTB基因引物序列，（2） 表示56℃时ACTB基因引物序列

用DNA提取试剂盒提取外周血DNA；用EZ DNA Methylation-Gold试剂盒对外周血DNA进行亚硫酸氢盐修饰。qMSP（SYBR green-based quantitative methylation-specific PCR）是采用甲基化特异性引物和荧光染料SYBR Green I对目的基因进行定量，再以ACTB基因作为内参基因对样本间在模板量上的差异进行校正。甲基化特异性引物序列见表1。阳性对照为对健康人白细胞使用美国Thermo Scientifc公司甲基化转移酶和亚硫酸氢盐处理过的基因组DNA，空白对照为ddH2O。每次反应重复进行。DNA甲基化水平使用甲基化百分比参数（PMR）表示。