《表1 待测基因引物序列:缺氧缺血损伤新生大鼠大脑海马组织线粒体DNA羟甲基化水平》

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《缺氧缺血损伤新生大鼠大脑海马组织线粒体DNA羟甲基化水平》


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海马组织经液氮研磨后,使用RIPA在低温条件下进行组织裂解,裂解后离心去除沉淀,收集上清。使用BCA方法进行样本定量。定量后样本进行10%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳并将凝胶上的条带通过半干转印的方法转移到PVDF膜上,PVDF膜经4℃过夜孵育TET1(abcam,ab191698)、TET2(MultiSciences,70-ab6739-050)和DNMT1(Boster,A00172-1)一抗,进而在室温下经HRP标记的二抗(Beyotime,A0208)孵育1h后,加入ECL化学发光液及显色液(Forevergen,广州)显色。TOMM20(boster,BM4366)作为内参。