《表2 PCR引物序列:安寐丹通过线粒体介导的海马神经细胞凋亡改善睡眠剥夺模型大鼠的学习记忆水平》

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《安寐丹通过线粒体介导的海马神经细胞凋亡改善睡眠剥夺模型大鼠的学习记忆水平》


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PCR检测Bcl-2,Bax,Cyt-C,Caspase-3 m RNA的表达将海马组织使用RNA提取液(trizol)法提取总RNA。总RNA(0.5 mg·L-1)1μL,加入引物(0.2 mg·L-1)1μL逆转录c DNA,c DNA 2μL继续扩增,步骤依次为预变性94℃3 min,1个循环,变性94℃30 s,退火8℃30 s,延伸72℃45 s,循环40次。系统自动计算Ct值。以β-actin为内参,采用2-ΔΔCt计算各组m RNA水平,引物设计运用Prime 5软件,利用Blast检测引物扩增后序列和基因序列的匹配程度,所需引物由武汉赛维尔生物技术有限公司代合成,序列见表2。