《表3 PCR引物序列:温胆汤含药血清对CREB mRNA沉默海马神经元细胞凋亡及BDNF/TrkB/CREB信号通路的影响》

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《温胆汤含药血清对CREB mRNA沉默海马神经元细胞凋亡及BDNF/TrkB/CREB信号通路的影响》


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PCR检测细胞BDNF,Trk B,CREB,CAMKⅡm RNA的表达取适量各组细胞,按实验步骤依次提取总RNA并测定其含量、合成c DNA,PCR扩增,PCR反应条件为95℃预变性5 min,95℃变性15 s,60℃退火20 s,72℃延伸40 s,共40个循环。以GAPDH为内参,c DNA为模板扩增,2-ΔΔCt法计算m RNA相对表达量,引物序列由江苏凯基生物技术股份有限公司合成,见表3。