《表1 引物序列：硒对金黄色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮细胞Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键因子mRNA转录水平的影响》

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《硒对金黄色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮细胞Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键因子mRNA转录水平的影响》

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将1.3中各组各时间点提取的总RNA利用反转录试剂盒反转录获得cDNA后，分别以其为模板，采用荧光定量（qPCR）方法检测Nod2、RIP2、JNK、AKT、m TOR、IL-8、IL-10和β-actin的m RNA的转录水平，引物序列见表1，同时设β-actin为参考基因。反应体系总体积为20μL，其中SYBR Green PCR mix 10μL，上下游引物（10μmol/L）各0.8μL，cDNA模板2μL，dd H2O 6.4μL。PCR反应条件为：95℃2 min；95℃10 s、60℃30 s、72℃30 s，30个循环。