《表1 引物基因序列:腹部推拿对慢性疲劳综合征模型大鼠行为学及海马区BDNF、CREB mRNA表达的影响》

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《腹部推拿对慢性疲劳综合征模型大鼠行为学及海马区BDNF、CREB mRNA表达的影响》


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将各组大鼠断头,剥离大脑并分离出海马,将剥离的海马组织转移到已清洗干净并高温烘干灭活RNA酶的冻存管中,立即投入液氮中,后移至-80℃冰箱。将上述组织样品,分别加入TRIZOL试剂、氯仿、异丙醇后勾浆离心,移去上清液,每1mlTRIZOL试剂勾浆的样品中加入至少1 ml的75%乙醇,清洗RNA沉淀。震荡离心后去除乙醇溶液,空气中干燥RNA沉淀,提取的RNA保存于-70℃冰箱中。后采用一步RT-PCR法,引物基因序列如表1,PCR仪中48℃孵育45 min,94℃孵育2min后进入PCR循环,扩增产物于4℃下保存。紫外透射仪上观察电泳条带并拍照。采用IPP6.0图像处理软件提取并计算条带光密度值,以目的片段与内参照(β-actin)扩增条带的光密度积分值比值评定目的片段mRNA的表达水平。