《表1 引物序列：天王补心丹加减对睡眠剥夺大鼠学习记忆及炎症因子表达的影响》

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《天王补心丹加减对睡眠剥夺大鼠学习记忆及炎症因子表达的影响》

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PCR检测大鼠下丘脑中EBI3，ERK5和PAK4的m RNA表达水平大鼠取血后断头处死，冰上迅速分离下丘脑，放入冻存管后液氮保存。取组织剪碎后加入trizol裂解液1 m L，研磨，4℃下高速冷冻离心机12 000 r·min-1离心15 min，取上清，匀浆提取总m RNA并进行质检，逆转录，加样，扩增。Real-time PCR仪扩增条件为95℃10 min，5个循环，95℃15 s，58℃1 min，65℃30 s，40个循环，采用2-ΔΔCt法表示各m RNA表达。大鼠EBI3，ERK5，PAK4及内参β-肌动蛋白（β-actin）引物均由上海其明基因技术有限公司设计合成，引物序列见表1。