《表1 引物序列：天王补心丹加减干预睡眠剥夺大鼠能量代谢机制的生物信息学分析》

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《天王补心丹加减干预睡眠剥夺大鼠能量代谢机制的生物信息学分析》

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RNA抽提：使用2.4项同批样品，方法同2.4.1项。逆转录：依次加入5×g DNA Eraser Buffer 2μL，g DNA Eraser 1μL，总RNA 1μL，RNase Free d H2O6μL后，室温静置10 min；再依次加入Prime Script RT Enzyme MixⅠ1μL，RT Prime mix 1μL，5×Prime Script buffer2 4μL，RNase Free d H2O 4μL后，以条件37℃15 min，85℃5 s进行逆转录。扩增：每孔取2μL逆转录反应产物，依次加入Reverse Primer 0.4μL，SYBR Premix Ex TaqTM(2×）10μL，dd H2O 7.2μL和Forward Primer 0.4μL。置入PCR仪，扩增条件：95℃10 min，循环5次，95℃15 s，58℃1 min，65℃30 s，循环40次。使用2-ΔΔCt法进行数据分析，各引物序列见表1。