《表2 基因引物序列：G6PD缺陷对1,4-苯醌致K562细胞DNA甲基化的影响及其机制》

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《"G6PD缺陷对1,4-苯醌致K562细胞DNA甲基化的影响及其机制"》

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将经过处理过的8组细胞收集至15 mL离心管，1 200 r/min离心5 min，弃上清。向离心管中加入2 mL PBS，1 200 r/min离心5 min，弃去上清，细胞转移至1.5 mL EP管中，细胞总RNA采用Trizol法提取。NanoPhotometer?spectrophotometer检测RNA纯度。所有样品RNA的D（260）/D（280）比值在1.8～2.0。在逆转录为cDNA后，通过SYBR?Green Real time PCR Master Mix-Plus-试剂盒进行扩增，反应体系为10μL（无酶水2.2μL，SYBR Green qPCR SuperMix5μL，Plus溶液1μL，浓度为10μmol/L的目的基因上、下游引物各0.4μL），qPCR扩增条件为95℃、5min预变性，40个循环扩增（95℃、15 s，60℃、1min）。每个样品设置3个复孔。采用2-ΔΔCT法计算mRNA的相对表达水平:ΔCT=CT，目的基因-CT，actin；ΔΔCT=ΔCT，实验组-ΔCT，对照组。引物序列见表2。