《表1 引物序列:胆固醇对K562及耐药株K562G细胞增殖及伊马替尼敏感性的影响》

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《胆固醇对K562及耐药株K562G细胞增殖及伊马替尼敏感性的影响》


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在6孔板中培养K562和IM耐药K562G细胞24 h,收集细胞,加入Trizol提取细胞总RNA,经过计算将每种细胞的2μg RNA用于反转录得到cDNA;分别加入等量的cDNA(4μl)和胆固醇代谢相关酶引物(合成通路相关酶HMGCR、SQLE、CYP51A1、SC5D、胆固醇吸收LDLR、胆固醇排出ABCA1、胆固醇酯化SOAT1)各(0.5μL)以及2×Loading Buffer,利用罗氏qRT-PCR检测仪器进行检测。以GAPDH为内参,采用2-dd Ct方法计算相对表达水平(表1)。